氣相色譜指紋圖譜評價沉香化氣片質量-KQ2200B使用

沉香化氣片收載于《中華人民共和國衛生部藥 品標準中藥成方制劑》第七冊，全方由沉香、木香、廣藿香、香附、砂仁、陳皮等 10 味藥組成，具有理 氣疏肝、消積和胃的功效，用于治療肝胃氣滯、脘腹脹痛、胸膈痞滿、不思飲食、噯氣泛酸。其中木香、廣 藿香、砂仁和陳皮 4 味藥材蒸餾提取揮發油后入藥。 廣藿香揮發油具有抗炎、抗菌、鎮咳及調節胃腸道的功能，百秋李醇為廣藿香的主要揮發性成分，也 是廣藿香質量評價的指標成分；砂仁揮發油具有明 顯的消炎鎮痛、抗氧化、促進胃腸運動等多方面的功效，其主要成分為樟腦和乙酸龍腦酯；陳皮性溫、 味苦、辛，陳皮揮發油具有很好的促胃動力作用。

1 實驗部分

1．1 儀器、試劑與材料

氣相色譜儀（ＧＣ－2010）、氣相色譜－質譜聯用儀 （ＧＣＭＳ－ＴＱ8040）配電子轟擊（ＥＩ）源（日本島津公 司）；1 ／ 10 萬電子分析天平（ＳＱＰ，賽多利斯科學儀 器有限公司）；超聲波清洗器（ＫＱ－2200Ｂ，昆山舒美超聲儀器有限責任公司），Ａｇｉｌｅｎｔ ＤＢ－5（30 ｍ×0. 25 ｍｍ×0. 25 μｍ）色譜柱（美國 Ａｇｉｌｅｎｔ 公司）。 甲醇（色譜純，美國天地有限公司），乙醇（分析 純，重慶川東化工集團有限公司），Ｄ－檸檬烯對照品 （純度＞98％，批號 Ｚ28Ｄ8Ｈ51809，上海源葉生物科 技有限公司），乙酸龍腦酯對照品和百秋李醇對照品（純度均＞ 98％，批號分別為 ＭＵＳＴ－18022605 和 ＭＵＳＴ－17073111，成都曼斯特生物科技有限公司）， 正十八烷（純度＞99％，批號 Ｇ9814，山東西亞化學股 份有 限 公 司），20 批 沉 香 化 氣 片 （批 號 分 別 為 18030026、 18020015、 18010007、 18020013、 18030029、 18030024、 18020012、 18030019、 18030023、 17120095、 18040031、 18020016、 18030022、 18030027、 17070058、 18040033、 18010006、18040030、18030021 和 17060049，依次記 為 Ｓ1～ Ｓ20，太極集團）。

1．2 對照溶液的制備

內標溶液：精密稱取正十八烷適量，加甲醇制得 濃度為 32. 6 ｍｇ ／ Ｌ 的正十八烷內標溶液。 對照品溶液：精密稱取 Ｄ－檸檬烯、乙酸龍腦酯、 百秋李醇對照品適量，加甲醇分別制成質量濃度為 61. 54、37. 5 和 53. 3 ｍｇ ／ Ｌ 的對照品溶液，即得。

1．3 供試品溶液的制備

取 10 片沉香化氣片，研勻，精密稱定 0. 5 ｇ，置 于具塞錐形瓶中，加入 10 ｍＬ 乙醇，稱量，超聲（頻 率 40 Ｈｚ，功率 100 Ｗ）處理 30 ｍｉｎ，放冷，再稱定質 量，用乙醇補足減少的重量，搖勻，靜置，取上清液經 濾紙濾過，將濾液過 0. 22 μｍ 有機相微孔濾膜，取 續濾液 1 ｍＬ 置于 5 ｍＬ 量瓶中，精密加入 0. 5 ｍＬ 內標溶液，加乙醇至刻度，搖勻，即得。

1．4 色譜條件

1．4．1 氣相色譜條件

色譜柱：Ａｇｉｌｅｎｔ ＤＢ－5（30 ｍ×0. 25 ｍｍ×0. 25 μｍ） 柱；載氣：氮氣；進樣口溫度：250 ℃；進樣模式：分流；分 流比：5 ∶1。程序升溫：初始溫度為 60 ℃，保持 2 ｍｉｎ， 以 2. 5 ℃ ／ ｍｉｎ 的速率升溫至 250 ℃，保持 10 ｍｉｎ。平 衡時間：3 ｍｉｎ；ＦＩＤ 檢測器溫度：250 ℃；進樣量：1 μＬ。

1．4．2 質譜條件

離子源：ＥＩ 源；離子源溫度：200 ℃；接口溫度： 250 ℃；載氣：氦氣；溶劑延遲：2. 5 ｍｉｎ；掃描范圍： ｍ ／ ｚ 45～500。

2 結果與討論

選擇在氣相色譜儀和氣相色譜－質譜聯用儀上 檢測性質穩定、定量準確、易于獲得的烷烴。以正十 八烷標準品溶液進樣分析，所得譜圖與樣品譜圖重 疊比較，對共有峰無干擾，選擇正十八烷為內標參照 峰，如圖 1 所示。

樣品以超聲提取法、回流提取法、冷浸法進行提 取，根據各成分的結構和性質，發現超聲提取法和回 流提取法均優于冷浸法，考慮到一些揮發性成分的 熱不穩定，且超聲提取法簡便快捷，故選擇超聲提取 法。對提取溶劑（甲醇、乙醇、水、30％ （體積分數， 下同）甲醇、50％ 甲醇和 80％ 甲醇）進行考察，結果 表明乙醇對待測成分的提取優于甲醇，故選擇乙醇 為提取溶劑。對提取時間（30、45 和 60 ｍｉｎ）進行了 考察，結果表明提取時間≥45 ｍｉｎ 時，提取效果無 明顯差異，故選擇提取時間為 45 ｍｉｎ。分別精密吸取適量對照品溶液和適量內標溶 液，加甲醇稀釋成 6 個不同水平濃度的對照品溶液， 按 1. 4. 1 節方法進樣測定，3 個組分在各自的范圍 內線性關系良好，相關系數（ｒ）均不小于 0. 999。以 3 個組分的峰面積 ＲＳＤ 來評價定量分析的精密度、 重復性和穩定性，ＲＳＤ 均小于 3％，滿足定量分析的 要求。20 批 樣 品 中，Ｄ－檸 檬 烯 的 含 量 為 0. 802 ～ 5. 490 ｍｇ ／ ｇ，乙酸龍腦酯的含量為 0. 074 ～ 0. 218 ｍｇ ／ ｇ，百秋李醇的含量為 0. 140 ～ 0. 732 ｍｇ ／ ｇ。各 組分含量的差異可能是所用原藥材的成分波動和生 產過程的波動所導致的。

3 結論

本文建立了沉香化氣片的氣相色譜指紋圖譜， 確定了 11 個共有峰，并測定了其中 3 個組分的含 量，結合化學模式識別評價 20 批樣品的質量。20 批樣品的相似度均大于 0. 9，為了更客觀地反映沉 香化氣片的內在質量，采用各指標成分的峰面積進 行不同批次樣本的化學模式識別，可用于批次間的 區分和歸類，主要將 20 批樣品分為 2 類，主成分分 析結果能夠反映 20 種樣本的色譜圖直觀結果，找到 了引起不同批次間質量差異的主要成分為 Ｄ－檸檬 烯、樟腦、乙酸龍腦酯、4，7－ｍｅｔｈａｎｏａｚｕｌｅｎｅ、α－布藜 烯。以上結果表明氣相色譜指紋圖譜結合化學模式 識別為沉香化氣片的質量控制提供簡單、可靠的方法。