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抑郁癥（Depression）是一種較為常見的情緒障礙 綜合征，其由多種生物學異常體征、癥狀組成，患 者主要表現為顯著持久的心境低落、悲觀厭世、思 維及認知遲緩，并伴隨失眠等睡眠障礙，有些患者 甚至有自殺傾向。全球重度抑郁癥發病率為 4.4%， 中國發病率為 3.02%，世界衛生組織（WHO）已將重 度抑郁癥列為全球第三大疾病負擔。目前，該疾病 的治療主要以西藥為主，如氟西汀、文拉法辛、度 洛西汀等，但存在臨床治愈率低、殘留癥狀突出、 復發率高、易導致臟器功能紊亂等不足，使其臨床 應用受到限制。越來越多研究表明，中藥及其復方 制劑在治療抑郁癥方面表現出獨特的效果和優勢。
1 材料
1.1 動物
健康雄性 ICR 小鼠，SPF 級，體質量（21± 2）g，購于北京華阜康生物科技公司，動物生產許可 證號：SCXK（京） 2014-0004。飼養環境：室溫（22± 2）℃，相對濕度 65%～70%，光照 12 h，自由飲食、 攝水。
1.2 藥品及試劑
SHF 皂苷部位提取物，由本課題組 制備；白樺脂醇（批號：PS14072405）、白樺脂酸（批號：PS10052503，純度 ≥ 98%），成都普思生物 科技有限公司；解郁安神顆粒（批號：20170103075）， 吉林百姓堂藥業有限公司；鹽酸文拉法辛膠囊（規 格：25 mg，批號：171003），成都康弘藥業集團股 份有限公司。戊巴比妥鈉，山東西亞化學工業有限 公 司 ； 重 酒 石 酸 去 甲 腎 上 腺 素 - 水 合 物（批 號 ： 100169-199402），中國食品藥品檢定研究院；5-HT （批號：157728）、鄰苯二甲醛，北京百靈威科技公 司；多巴胺鹽酸鹽（批號：A0305），梯希愛（上海）化 成 工 業 發 展 有 限 公 司 ； L- 半 胱 氨 酸（批 號 ： 2010129），天津市博迪化工有限公司；高碘酸鈉（批 號 ： 20100715）， 天 津 市 大 茂 化 學 試 劑 廠 ； 鹽 酸 （AR），北京化工廠；正庚烷、碘、EDTA-2Na、無 水亞硫酸鈉、磷酸氫二鉀、氫氧化鈉、醋酸、醋酸 鈉、碘化鉀等（AR），天津基準化學試劑有限公司。
1.3 主要儀器
AUX120 型十萬分之一分析天平、 RF- 5301PC 型熒光分光光度計，日本島津公司； 昆山舒美KQ-200KBD 型超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限 公司；超純水機（Millipore Ultra-pure Water），美國 密理博公司；TD5A-WS 型臺式低速離心機，長沙湘 儀離心機儀器有限公司。
2 方法
2.1 分組、模型復制及給藥
小鼠隨機分成 7 組，每 組 10 只，分別為空白組（蒸餾水，10 mL·kg-1 ）、模 型對照組（蒸餾水，10 mL·kg-1 ）、文拉法辛組（9.38 mg·kg- 1 ）、解郁安神組（650 mg·kg- 1 ）、SHF 皂苷組 （30 mg·kg-1 ）、白樺脂醇組（4 mg·kg-1 ）和白樺脂酸組 （12 mg·kg- 1 ）。各組小鼠在適應環境 3 d 后開始造 模。從造模的第 1 天開始，每天 8: 00~8: 30 灌胃給藥，持續 21 d。以禁食 24 h、禁水 24 h、夾尾、晝 夜顛倒、冷熱水游泳、睡眠剝奪等 10 種應激因素， 21 d 內隨機安排，每天給予任意 2 種刺激（造模日程 表略）。每種刺激不可連續出現，使動物不可預見給 予 的 刺 激 ， 以 此 來 復 制 慢 性 不 可 預 期 溫 和 應 激 （CUMS）抑郁失眠小鼠模型。
2.2 指標檢測
各組小鼠的抑郁及睡眠情況通過國際 公認的行為學觀測實驗結果來反饋，作用機制的假 設則通過檢測各組小鼠腦組織的單胺類神經遞質的 含量來驗證。
2.2.1 懸尾實驗
（TST） 于測試當日給藥后 1 h，將小 鼠尾部固定在一水平木棍上，使其呈倒掛狀態，四 周用紙板隔開小鼠視線。具體操作步驟及評價標準。實驗共進行 6 min，前 2 min 為適應時 間，記錄后 4 min 內小鼠的 TST 不動時間，即失望時間。
2.2.2 強迫游泳實驗
（FST） 于測試當日給藥后 1 h， 將小鼠單獨放入透明玻璃缸中。玻璃缸置于安靜的 房間，保持適宜的水深及水溫。具體操作步驟及評 價標準 。實驗共進行 6 min，前 2 min 為 適應時間，記錄后 4 min 內實驗小鼠的 FST 不動時 間。單只小鼠實驗結束后，清洗玻璃缸。
2.2.3 閾上劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠實驗
于測試 當日給藥后 30 min，不同組別小鼠腹腔注射閾上劑 量（40 mg·kg-1 ）戊巴比妥鈉。注射后開始計時，記錄 睡眠潛伏期及睡眠時間。睡眠起始時間為翻正反射 消失時間，睡眠結束時間為翻正反射恢復時間，期 間即為小鼠睡眠時間，睡眠時間＞60 min 的小鼠， 按 60 min 記錄。腹腔注射至睡眠起始時間為睡眠潛 伏期，潛伏期超過 15 min 的小鼠，按 15 min 記錄。
2.2.4 腦組織單胺類神經遞質含量測定
不同組別小 鼠于末次給藥后 30 min，除空白組外，其他各組小 鼠均給予 1 min 懸尾刺激；刺激后立即斷頭處死小 鼠，分別取海馬及大腦皮層組織于 2 個 EP 管中。采 用熒光分光光度法在指定波長下測定小鼠腦組織中 海 馬 及 皮 層 區 域 的 多 巴 胺（DA）、 去 甲 腎 上 腺 素 （NE）、 5- 羥 色 胺（5- HT）的 含 量 ， 計 算 ： 含 量 （ng·g-1 ）=（F 樣品－F 組織空白）（/ F 標準品－F 試劑空白）×C 標準品× V 標準品×1.5×1/m 腦組織，F 表示熒光強度，C 表示液體濃 度，V 表示液體體積。 2.3 統計學處理方法 采用 SPSS 21.0 統計軟件進行 數據分析；計量資料以均數±標準差（x ± s）表示；多 組間比較采用單因素方差分析（One-way ANOVA）， 兩兩比較采用 LSD 檢驗；以 P < 0.05 為差異有統計學意義。
3 結果
與空白組 比較，模型對照組的 TST 不動時間明顯增加（P< 0.01）。與模型對照組比較，文拉法辛組、解郁安神 組、SHF 皂苷組小鼠的 TST 不動時間顯著減少，差 異具有統計學意義（P < 0.01）；白樺脂醇組、白樺脂 酸組的 TST 不動時間雖有降低，但差異無統計學意 義（P > 0.05）。結果表明，SHF 皂苷可以通過 TST 指 標表現出一定的抗抑郁作用。與空白組 比較，模型對照組的 FST 不動時間明顯增加（P < 0.05）。與模型對照組相比，文拉法辛組、解郁安神 組、SHF 皂苷組、白樺脂酸組小鼠的 FST 不動時間 顯著減少，差異具有統計學意義（P < 0.05，P < 0.01）。結果表明，SHF 皂苷及白樺脂酸在 FST 指標 上表現出抗抑郁作用。與空白組比較， 模型對照組的睡眠潛伏期顯著延長（P < 0.01），睡眠 時間縮短，但差異無統計學意義（P > 0.05）。與模型 對照組比較，各給藥組小鼠的睡眠潛伏期時間均顯 著縮短（P < 0.01）；文拉法辛組、解郁安神組、SHF 皂苷組及白樺脂酸組的小鼠閾上劑量戊巴比妥鈉所 致 睡 眠 時 間 明 顯 延 長 ， 差 異 有 統 計 學 意 義（P < 0.05，P < 0.01）。結果表明，SHF 皂苷及白樺脂醇、 白樺脂酸可能與戊巴比妥鈉存在協同作用，可縮短睡眠潛伏期。SHF 皂苷及白樺脂酸還在一定程度具 有延長睡眠時間的作用。
4 討論
抑郁癥的發病機制至今尚未完全明了，近年來臨 床上出現多種有關該病發病機制的理論或學說，如 去甲腎上腺素假說、多巴胺假說、神經可塑性通路 調節學說等，雖然觀點不一，但都認為抑郁癥的發 生與外界壓力刺激相關。抑郁癥相關研究在建立動 物實驗模型時，基本都通過不同的應激刺激來實 現。CUMS 抑郁失眠模型是國際上得到普遍認可的抑 郁動物模型之一，通過隨機給予嚙齒類動物不同的不具威脅性的應激因素，來模擬因外界壓力使實驗 動物產生與抑郁癥患者類似的行為。
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