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金銀花為忍冬科植物忍冬 Lonicera japonica Thunb． 的干燥花蕾或帶初開的花，為臨床常用中 藥，具有疏散風熱、清熱解毒的功效，其總黃 酮有抗氧化、抗炎、抗心律失常、抑菌、保肝等作用，但其水溶性差，相關口服制劑 ( 金銀花糖 漿、復方金銀花顆粒等) 生物利用度低，從而限 制藥效發揮，影響臨床應用。將金銀花總黃酮制成自微乳可能會提高其水溶性， 但目前尚無相關研究。
1 材料
1. 1 儀器
ZEN3600 型激光粒度儀 ( 英國 Malvern 公司) ; UV762 型紫外可見分光光度計 ( 上海佑科 儀器儀表有限公司) ; KQ5200E 型超聲波清洗器( 昆山舒美超聲儀器有限公司) ; FA1004B 型電子精 密天平 ( 上海越平科學儀器有限公司) ; TGL-16C 型離心機 ( 上海安亭科學儀器廠) ; ＲE-2000A 型 旋轉蒸發器、DF-101S 型集熱式恒溫加熱磁力攪拌 器 ( 鞏義市予華儀器有限責任公司) 。
1. 2 試藥
蘆丁對照品 ( 含有量≥99%，批號 100080，上海源葉生物科技有限公司) ; 金銀花總 黃酮 ( 批號 180326，自制，以蘆丁計算含有量為 74. 6%) 。金銀花購于西安市萬壽路藥材市場，經 西安醫學院藥學院邊軍昌高級實驗師鑒定為忍冬科 植物 忍 冬 Lonicera japonica Thunb． 的 干 燥 花 蕾。 D101 大孔吸附樹脂 ( 陜西藍深科技有限公司) ; 聚氧乙烯氫化蓖麻油 ( ＲH-40) 、聚氧乙烯蓖麻油 ( EL-35) ( 德國巴斯夫公司) ; 曲拉通 ( X-100，成 都市科龍化工試劑廠) ; 吐溫-80 ( 天津富宇精細化 工有限公司) ; 辛酸癸酸三甘油酯 ( 上海千為油脂 科技有限公司) ; 肉豆蔻酸異丙酯 ( 國藥集團化學 試劑有限公司) ; 油酸乙酯 ( 天津市光復精細化工 研究所) ; 聚乙二醇 400 ( 天津市科密歐化學試劑 有限公司) ; 1，2-丙二醇 ( 天津市北聯精細化學品 開發有限公司) ; 異丙醇 ( 天津市河東區紅巖試劑 廠) 。其他試劑均為分析純; 水為超純水。
2 方法與結果
精密稱取蘆丁對照品 20. 0 mg，置于 50 mL 量瓶中，70%乙醇溶解定容， 得 0. 400 mg /mL 對照品溶液，精密移取 0. 0、1. 0、 1. 5、2. 0、2. 5、3. 0、3. 5、4. 0 mL，置于 10 mL 量瓶中，依次加入 5%亞硝酸鈉 0. 4 mL，搖勻，靜 置 6 min; 10%硝酸鋁 0. 4 mL，搖勻，靜置 6 min; 4%氫氧化鈉 4 mL，加水定容至刻度，搖勻，靜置 15 min，以相應試劑為空白對照，在 510 nm 波長 處測定吸光度。以溶液質量濃度為橫坐標 ( X) ， 吸光度為縱坐標 ( A) 進行回歸，得 方 程 為 A =4. 366 1X + 0. 011 3 ( r = 0. 997 1 ) ，在 0. 04 ～ 0. 16 mg /mL范圍內線性關系良好。稱取藥材粗粉適量，置于索氏提 取器中，石油醚連續回流至提取液無色后取出晾 干，加入 10、8、6 倍量 70%乙醇回流提取 3 次， 每次 1. 5 h，提取液合并，減壓濃縮至無醇味，6 倍量蒸餾水攪拌溶解，12 h 后離心，上清液減壓 濃縮至適當濃度，備用。將預處理好的 D101 大孔吸附 樹脂 倒 入 燒 杯 中，加入總黃酮濃縮液靜態吸附 12 h，將達到吸附飽和的樹脂裝入層析柱中，依次 用 6 BV 蒸餾水、5 BV 30%乙醇洗脫除去雜質，再 用 5 BV 70%乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙 醇，即得總黃酮。精密稱取干燥至恒重的總黃酮 50 mg，置于 25 mL 量瓶中，70%乙醇溶解定，精 密移取 2. 0 mL 置于 25 mL 量瓶中，按 “2. 1”項 下方法測定吸光度，測得總黃酮含有量為 74. 6%。
3 討論
采用 D101 大孔吸附樹脂分離純化金銀花總黃酮時，依次用適量純化水和 30%乙醇除雜， 再用 70%乙醇洗脫，發現純度較高，粒徑較預實 驗沒有除雜所得的自微乳減小，載藥量顯著增大， 說明理化性質差別較大的雜質會對其形成產生特殊 影響。因此，在對中藥有效部位自微乳處方進行研 究時，應盡可能采用多種純化方法提高其純度。
