近紅外光譜法測定裸花紫珠提取液

裸花紫珠( Callicarpa nudiflora Hook． et Arn． ) 是 馬鞭草科植物裸花紫珠的干燥葉，消炎，止血，祛風 濕和解腫毒等功效顯著。裸花紫珠提取液是由 裸花紫珠藥材加工提取而成，提取液作為中藥制劑 生產的中間過程，對裸花紫珠顆粒的療效具有一定 的影響。目前，藥品含量測定通常采用高效液相色 譜法和紫外分光光度法等分析方法，樣品前處理較 為復雜，檢測時間較長，不能及時快速反饋提取液的 質量信息，導致浪費人力、物力。因此，當務之 急是建立裸花紫珠提取液含量的在線檢測方法，實 現實時監測。

1 儀器與材料

1． 1 儀 器

近紅外光譜分析儀 ( MPA 型，德 國 BRUKER 公司) ; 島津 LC － 20AT 高效液相色譜儀; AB104 － N 萬 分 之 一 天 平 ( 梅 特 勒 － 托 利 多) ; AUW2200 十萬分之一天平 ( SHIMADZU 島 津) ; KQ5200DE 型數控超聲波清洗器( 昆山市超聲儀器 有限公司)

1． 2 材料

甲酸( 分析純) ，乙腈( 色譜純) 。木犀 草苷對照品( 批號: 111720 － 201609) 和毛蕊花糖苷 對照品( 批號: 121582 － 201402) 均購自中國食品藥 品檢定研究院。 65 批裸花紫珠藥材提取液，江西普正制藥有限 公司提供藥材。

2 實驗方法

分別稱取木犀草苷和毛 蕊花糖苷對照品適量，加 70% 甲醇溶液溶解，制成 濃度為 80． 2μg． mL － 1木犀草苷和 300． 4μg． mL － 1毛 蕊花糖苷混合對照品溶液。取裸花紫珠藥材約 20g， 精密稱定，煎煮二次，第一次加入藥材總量 10 倍量 的水，武火煮沸，文火煎煮 2h，濾過，藥渣再加入藥 材總量 10 倍量的水，武火煮沸，文火煎煮 1h，濾過， 合并兩次的煎煮液，作為供試品溶液。將裸花紫珠提取液注入樣品 腔內，在 12500 ～ 3500cm － 1范圍內采集 NIR 光譜，分 辨率為 8cm － 1，掃描次數為 32，每批樣品采集 3 次， 取其平均光譜。

3 結果

選擇不同的光譜范圍，對光譜 進行內部交叉驗證，以相關系數 r 和內部交叉驗證 均方差 RMSECV 作為評判指標。NIR 光譜圖受樣品的狀態、基線漂移和 高頻噪音等因素影響，需采用矢量歸一化法、消除常 數偏移量法和二階導數等預處理方法，消除光譜干 擾，優化定量模型。結果如表 3 所示，木犀草苷經消 除常數偏移量法處理，r 為 0． 9476，RMSECV 為 0． 00689; 毛蕊花糖苷經矢量歸一化法處理，r 為 0． 963，RMSECV 為 0． 156。共 65 批樣品，根據提取液 中指標成分的含量分布范圍，選擇 11 批樣品作為驗 證集，木犀草苷剔除 1 批特異值，53 批作為校正集， 毛蕊花糖苷剔除 7 批特異值，48 批作為校正集。木 犀草苷在 12493． 2 ～ 7494． 3cm － 1 ; 6101． 9 ～ 5774． 1cm － 1光譜范圍內，經消除常數偏移量法處理，選定 維數為 10，建立定量校正模型，其相關系數 r 為 0． 9476，RMSECV 為 0． 00689。毛蕊花糖苷在 6101． 9 ～ 5774． 1cm － 1 光譜范圍內，經矢量歸一化法處理， 選定維數為 8，建立定量校正模型，其相關系數 r 為 0． 963，RMSECV 為 0． 156。結果表明裸花紫珠提取 液光譜與木犀草苷和毛蕊花糖苷的含量之間存在良 好的相關性。

4 結論

本實驗采用近紅外光譜技術中的偏最小二乘 法，建立裸花紫珠提取液中木犀草苷和毛蕊花糖苷 的定量分析模型，并采用驗證集樣本對模型進行驗 證，其相關系數分別為 0． 9854 和 0． 9924。經研究 表明，近紅外光譜法可以快速、準確的測定裸花紫珠 提取液中木犀草苷和毛蕊花糖苷的含量。