KQ3200E型對于柴胡桂枝湯的研究分析

柴胡桂枝湯出自《傷寒論》，為張仲景創立的經典 方劑，由小柴胡湯和桂枝湯加減而來，全方由柴胡、半 夏、人參、甘草、黃芩、生姜、大棗、桂枝、芍藥 9 味藥組成， 既能調理營衛氣血，又能和解表里，疏肝利膽，達到扶正 祛邪之目的 ，用于太陽少陽合病引起的發熱惡寒、肢 體疼痛等癥。

島津公司 LC-IT-TOF-MS 液相色譜串聯離子阱 飛行時間質譜儀，配置自動進樣器、柱溫箱、UV 檢測 器；LC-MS solution 工 作 站；島 津 公 司 Inertsil ODSSP C18 色 譜 柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；Eppendorf 5424 R 小型冷凍高速離心機離心機；0.22 μm 微孔濾 膜，津騰公司；天津市泰斯特儀器有限公司 98- Ⅰ-B 電子調溫電熱套；賽多利斯科學儀器（北京）有限公 司 BSA224S-CW 電子天平；昆山市超聲儀器有限公 司 KQ3200E 型超聲波清洗器。

采用 Inertsil ODS-SP C18 色譜柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），以 0.1% 甲酸水溶液（A）-0.1% 甲酸甲醇 溶液（B）為流動相，梯度洗脫（0~3 min，30%B；3~18 min，30%B → 40%B；18~30 min，40%B → 50%B；30~57 min，50%B → 75%B；57~65 min，75%B → 85%B；65~70 min，85%B → 95%B；70~75 min，95%B；75~85 min， 95%B → 30%B），流速 0.6 mL·min-1，檢測波長 275 nm，柱溫 25 ℃，進樣量 5 μL。采用電噴霧化離子源，離子源溫度為 120 ℃，毛 細管電壓 3 200 V，質量掃描范圍 m/z 100~1 000，干燥 氣體積流量 10 L·min-1 ，干燥氣溫度 300 ℃。取 柴 胡 桂 枝 湯 藥 液，加 超 純 水 稀 釋 至 0.14 g·mL-1 ，渦旋 1 min，12 000 r·min-1 高速離心 10 min， 取其上清液過 0.22 μm 的微孔濾膜，即得供試品溶液。取各對照品適量，精密稱定，加甲醇配制成混合 對照品溶液（甘草苷 80 μg·mL-1 ，黃芩苷 85 μg·mL-1 ， 漢黃芩素 90 μg·mL-1 ，人參皂苷 Re 180 μg·mL-1 ，姜黃 素 75 μg·mL-1 ，芍藥苷 165 μg·mL-1 ），過 0.22 μm 微孔 濾膜，冷藏備用。

本實驗考察對比了不同的流動相系統，包括乙 腈 - 水、0.1% 甲酸乙腈 -0.1% 甲酸 水溶液、甲醇 - 水、0.1% 甲酸甲醇 -0.1% 甲酸水溶液；結果表明， 以 0.1% 甲酸甲醇 -0.1% 甲酸水溶液體系為流動 相，采用梯度洗脫，能夠達到較好的洗脫效果，各色 譜峰的峰形和分離度相對較好，故選用 0.1% 甲酸甲醇 -0.1% 甲酸水溶液作為流動相系統。柱溫考 察 15、20、25、30、40 ℃，柱溫度降低分離度增加，但 保留時間也相應延長，綜合考慮選擇 25 ℃作為分離 柱溫。流動相流速考察 0.4、0.6、0.8 mL·min-1。0.8 mL·min-1 色譜峰分離度降低，個別色譜峰發生合 并；0.4 mL·min-1 各色譜峰保留時間增加，故選擇 0.6 mL·min-1，分離度好，保留時間適中。