新疆紫草中總萘醌提取方法的比較

紫草 （Arnebia euchroma） 為我國傳統常用中 藥，始載于《神農本草經》，列為中品，多用于濕 疹、水火燙傷、麻疹不透等癥。臨床上常用于治療 皮膚病、慢性腎炎、燒燙傷、靜脈炎等。《中國藥 典》2015 年版規定，紫草為新疆紫草（Arnebia eu－ chroma（Royle）Johnst）或內蒙紫草（Arnebia. guttata Bunge）的干燥根，其中，以新疆紫草質量較優。研 究表明，新疆紫草含有多種活性成分，主要包括萘 醌類、生物堿、黃酮類、有機酸及多糖等；具有廣 泛的抗病毒作用、抗氧化活性、免疫調節及抗腫瘤 活性；以紫草素為代表的萘醌類成分為其主要 活性成分。

目前，紫草中總萘醌類成分的提取方法有超臨 界 CO2 萃取法、超聲提取法、溶劑浸提法、減壓蒸餾 法等。但是各種方法之間的提取效率、有效成分的 穩定性等方面存在差異。

為了篩選新疆紫草中總萘醌類化合物較為理 想的提取方法，本研究對回流提取法、滲漉提取法、 超聲提取法進行了比較研究。

UV-1800 紫外 - 可見分光光度儀（日本島津公司），Secura324-1CN 電子分析天平（賽多利斯），HH-S4 數顯恒溫水浴鍋（金壇市醫療器械廠），KQ-1000E落地式超聲波清洗機（昆山舒美超聲儀器有限公司）；電熱恒溫干燥箱、旋轉蒸發儀、恒溫水浴鍋（上海百典 儀器有限公司）。

供試新疆紫草購自山西省藥材公司，并經鑒定 為 Arnebia euchroma（Royel）Johnst。左旋紫草素對 照品購自中國藥品生物制品檢定所，其余所用試劑 均為分析純。

1.3.2.1 回流提取法 稱取粗粉 50.00 g，60 ℃分別加 8 倍和 6 倍 95%乙醇回流 2 次，時間分別為 2，1 h， 合并提取液，回收乙醇至浸膏狀，冷凍干燥，得干 膏備用。

1.3.2.2 滲漉提取法 稱取粗粉 50. 00 g，加 8 倍量 95%乙醇浸泡過夜，以 1 mL/min 流速進行滲漉，回 收乙醇至浸膏狀，冷凍干燥，得干膏，備用。

1.3.2.3 超聲提取法 稱取粗粉 50.00 g，分別加 8 倍 和 6 倍 95%乙醇超聲 2 次，每次 30 min，合并提取 液，回收乙醇至浸膏狀，冷凍干燥，得干膏備用。

1.3.3 標準曲線制備 精密稱取左旋紫草素對照 品 2.5 mg，置于 50 mL 容量瓶中，無水乙醇溶解定 容，即得質量濃度為 0.05 mg/mL 的對照品溶液。

分別精密量取對照品液 1，2，3，4，5 mL 置于 10 mL 容量瓶中，無水乙醇定容。采用紫外 - 可見 分光光度法，在 516 nm 處測定吸光度。

精密稱量不同提取方法 獲得的干膏 0.05 g，置 50 mL 容量瓶中，無水乙醇定 容，溶解過濾。量取濾液 5 mL，置 25 mL 容量瓶中， 無水乙醇定容，搖勻，即得樣品供試液。精密吸取上 述樣品供試液 1 mL，在線性關系下測定吸光度，并 計算出樣品中總萘醌的含量。

選擇總萘醌類得率最高的方 法，同時制取 5 份樣品溶液，連續測定其吸光度，計 算 RSD，考量其精密度。

選擇總萘醌類得率最高的方 法，精密量取樣品溶液 1 mL，每隔 30 min 重復測定 總萘醌含量，連續 5 h，計算 RSD，考察其不同時間 點的穩定性。

2.1 標準曲線制備 以吸光度（A） 為縱坐標，左旋紫草素對照品 （C）質量濃度（mg/mL）為橫坐標進行回歸分析，得 標準曲線方程為：A＝25.092 4C－0.004 1，r＝0.999 6， 在 5～25 mg/L 質量濃度范圍內，二者的線性關系 良好。

2.2 不同提取方法總浸膏得率及總萘醌含量比較 由表 1 可知，在 3 種方法中，總萘醌含量從大 到小依次為超聲提取法、回流提取法、滲漉提取法。

2.3 精密度試驗分析 采用超聲提取法提取 5 份樣品溶液，以吸光度 計算，RSD 為 2.61%，說明精密度良好。

2.4 穩定性試驗分析 采用超聲提取法，每隔 30 min 連續 5 h 重復測 定總萘醌含量，其 RSD 為 1.86%，說明提取液在 5 h 內穩定性良好。

紫草中總萘醌類成分脂溶性強，易溶于石油 醚、氯仿等有機溶劑，可溶于乙醇，微溶于水。在 測試過程發現，回流提取法在提取過程中，有效成 分損失較大。這與萘醌類成分不穩定，對光、熱等敏 感，其穩定性受溫度影響較大有關。

滲漉提取法的總浸膏得率最高，超聲提取法的 總萘醌含量最高。采用滲漉提取法，雖然總萘醌類 成分不是最高，但總浸膏得率較高。綜合比較，滲漉 法作為紫草中總萘醌類成分初始提取方法，可以有 效節約能源，且具有設備要求低、操作簡便等優點， 較適用于工業化量產。

相對于傳統的提取方法，超聲提取法獲得的總 萘醌類成分含量最高，研究表明，超聲波法無需加 熱、加壓，可以縮短提取時間，降低成本，提高生產 效率，但對設備要求較高。目前，雖然滲漉提取法 在工業化中使用較為普遍，但由于超聲提取法在減 少有機溶劑使用、降低環境污染等方面的優勢，決 定其在未來工業化方面具有廣闊的應用前景。因 此，超聲法提取紫草有效成分的工藝條件值得進一 步研究。