玉米黃質檢測方法建議（昆山舒美KQ-400DB應用）

在天然食品中，產生不同顏色物質基本上可 以分成兩大類：花青素和類胡蘿卜素。大部分的 花青素是水溶性的，而類胡蘿卜是脂溶性色素， 包括葉黃素類和胡蘿卜素類兩大類。葉黃素是一 種極為重要的天然類胡蘿卜素，廣泛存在于水 果、蔬菜、花卉與一些藻類的生物中，其中萬壽 菊中含量最高，并且從萬壽菊里提取葉黃素的方 法也比較普遍。

1 材料與儀器 

無水乙醇、正己烷、乙酸乙酯、甲醇：均 為分析純，天津市永大化學試劑有限公司；正己 烷、乙酸乙酯，均為色譜純：賽默飛世爾；葉黃 素微囊粉樣品：晨光生物科技集團股份有限公司 提供；葉黃素、玉米黃質標準品，純度≥ 97%： 購于 sigma 公司。 高效液相色譜儀 E2695：沃特世有限公司；數控超聲波清洗器 KQ-400DB：昆山市超聲儀器有限公司；萬分之一天平 AUW220：日本島津公司。 

2 實驗方法 

2.1 儀器方法的建立 

色譜柱：Welch Ultimate SiO2，4.6mm×250 mm，粒度 5μm，流動相：正己烷∶乙酸乙酯 = 70 ∶ 30，柱溫：28℃，流動相流速：1.5mL/min， 進樣量：20μL，檢測波長：446nm。 

2.2 標準溶液的配制 

分別稱取約 1mg（精確至 0.1mg）葉黃素和 玉米黃質標準品至 100mL 容量瓶內，用流動相 溶解，并定容至刻度，配制成 10μg/mL 標準儲備 液，臨用前用流動相進行稀釋，放 4℃冰箱進行 保存。

2.3 樣品的前處理 

準確稱取 0.05 ～ 0.07g（精確至 0.0001g）樣 品至 100mL 容量瓶中，加入 5mL 水，超聲使其 溶解，移液管移取 10mL 甲醇于該容量瓶中，搖勻，加 50mL 流動相至該容量瓶內，輕輕搖勻， 10% 無水硫酸鈉溶液定容，搖晃 1min（200 次 / min），暗放靜止 15min，取上層清液進行液相檢 測。

3 結果與分析

葉黃素微囊粉選取水作為溶解液，分別加 入不同量的水，然后按照 2.3 步驟進行試驗，研 究水的加入量影響，分別加入水 5mL、10mL、 15mL、20mL、25mL，結果顯示加水 10mL 時條 件最佳。稱樣加入 5mL 水超聲溶解后，加甲醇，增大乳化效應，對甲醇加入量做了優化對比，，分 別 對 5mL、10mL、15mL、20mL、25mL 進 行 驗證，測定結果加 10mL 甲醇效果最佳。美國藥典 USP 提供類似的制劑方法中，加水 溶解后使用乙酸乙酯萃取，但使用乙酸乙酯溶劑 效應較大，影響峰型，對結果有影響，本方法選 取使用與流動相正己烷∶乙酸乙酯 =70 ∶ 30，溶 劑效應較小，檢測精度較高，因此選擇流動相正 己烷∶乙酸乙酯 =70 ∶ 30 作為萃取劑。

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