效應面法優化芹菜籽揮發油羥丙基-KQ-250DE使用

芹菜籽為傘形科植物旱芹（Apium graveolens L.） 的干燥成熟果實。芹菜籽在維吾爾醫藥中廣泛應 用，具有消除寒濕閉陰，消食健胃，消腫散氣，消石 止痛，調和百藥等功效，是新疆資源豐富的藥食兼 用植物資源。芹菜籽中的揮發油是芹菜籽中的重要 成分，具有抗氧化、降低亞硝酸鈉活性、降低血 液黏度、抗腦缺血、降血壓等藥理作用。

1 儀器與材料

1.1 儀器

SSI 型高效液相色譜儀 （美國實驗儀器 公司）；Jade DSC 型差示掃描量熱儀 （美國 Perkin Elmer 公司）；UV2450 型紫外分光光度計 （日本島 津）；BT25S 型十萬分之一分析天平 （賽多利斯科學 儀器有限公司）；KQ-250DE 型數控超聲波清洗器 （昆山市舒美超聲儀器有限公司）；UPT-Ⅱ-10T 型超純 水器（四川優普超純科技有限公司）；SOP 型電子天 平（賽多利斯科學儀器有限公司）；85-2 型數顯恒溫 磁力攪拌器（江蘇中大儀器科技有限公司）；LGJ-10 型冷凍干燥機（北京松源華興科技發展有限公司）； ZDHW 型調溫電熱套 （北京中興偉業儀器有限公 司）；DK-98-Ⅱ型電熱恒溫水浴鍋（天津泰斯特儀器 有限公司）；WZJ-681 型振動式藥物超微粉碎機（濟 南倍力 粉 技 術 工 程 有 限 公 司）；Five Eosy PlusTM FE20 型 pH 計 （METTLER TOLEDO）；TG16-WS 型 臺式高速離心機（長沙湘儀離心機儀器有限公司）。

1.2 試藥

芹菜籽揮發油（實驗室自制）；羥丙基β-環糊精（山東濱州智源生物科技有限公司）；中性蛋 白酶（江蘇銳陽生物科技有限公司，200 000 U/g）；中 溫 α淀粉酶（江蘇銳陽生物科技有限公司，10 000 U/g）；丁苯酞對照品（批號 101035-201502，中國食品藥品 檢定研究院，含量以 99.6% 計）；甲醇（分析純，天津 康科德科技有限公司）；乙腈（色譜純，天津康科德 科技有限公司）；無水乙醇（分析純，天津市科密歐 化學試劑有限公司）；乙酸乙酯（分析純，天津市科 密歐化學試劑有限公司）；石油醚（分析純，天津市 科密歐化學試劑有限公司）；去離子水（自制，優普 系列超純水器）。

2 方法與結果

取芹菜籽適量，超微粉 碎機粉碎，過五號藥典篩。然后取過篩后的芹菜籽 粉 300 g，置于圓底燒瓶中，加入 1 800 mL 去離子 水浸泡 30 min。加磷酸調節 pH 至 6.2，加入 6 g 復合 酶（中性蛋白酶：中溫 α 淀粉酶=1∶1），混合均勻， 置 55 ℃水浴中酶解 2 h，然后采用水蒸氣蒸餾法提 取 5 h，即得淡黃色透明的芹菜籽揮發油，提取率 為 2.336%。精密稱取芹菜籽揮發油適 量于燒杯中，加適量的無水乙醇溶解；另取各實驗 對應的羥丙基-β-環糊精于燒杯中，加 2 倍量的水溶 解。將羥丙基-β-環糊精溶液置于磁力攪拌器上，固 定轉速，在各實驗對應的恒定溫度下逐滴加入揮發 油乙醇溶液，攪拌至規定時間，包合液以 2 000 r/min 的轉速離心 2 min 后，吸去上層未包合的揮發油，用 0.45 μm 孔徑微孔濾膜過濾，放至冷凍干燥機，冷凍 干燥 24 h 即得芹菜籽揮發油-羥丙基-β-環糊精包 合物。

3 討論

目前，包合揮發油的材料主要有 β-環糊精和羥 丙基-β-環糊精，羥丙基-β-環糊精是由 β-環糊精 和環氧丙烷縮合而成的一類羥烷基親水性衍生物， 與 β-環糊精相比具有水溶性好、疏水性空腔大、安 全性好等優點。本研究曾采用 β-環糊精對芹菜籽 揮發油進行包合，但是包合率低且重現性差，β-環 糊精水溶性差，不利于藥物溶出。因此本研究采用 羥丙基-β-環糊精包合芹菜籽揮發油，以包合率和 載藥量的 OD 值作為評價指標，根據重要程度分配 權重，優化出最優工藝。