珍珠菜提取物的抗缺氧作用-KQ500DE使用！

珍珠菜( Lysimachia clethroides Duby) 為報春花 科植物虎尾珍珠菜的根或全草，又叫扯根菜、山酸湯 稈、通筋草、酸罐罐等。具有活血調經、利水消腫等 功效。可治療婦女月經不調、小兒疳積、跌打損傷等。目前對珍珠菜的藥理學研究主要集中在抗 腫瘤和抗白血病 方面，而關于珍珠菜提取物耐 缺氧的研究卻未見報道。本研究建立常壓缺氧模 型、亞硝酸鈉中毒模型和急性腦缺血性缺氧模型，旨 在探究珍珠菜提取物的耐缺氧作用。

1 材料與方法

1. 1 儀器、試藥與動物

ＲT-6000 酶標儀( 美國，雷 杜) ，XFB-200 高速中藥粉碎機( 長沙市雨花區中誠 制藥機械廠) ，Centrifuge-5427 Ｒ 低溫高速離心機 ( 德國艾本德股份有限公司) ，N-1200B 旋轉蒸發儀 ( 上海愛朗儀器有限公司) ，SHZ-CD 循環水式多用 真空泵( 鞏義市予華儀器有限責任公司) ，JA2003 電 子天平( 上海浦春計量儀器有限公司) ，101-2A 電熱鼓風干燥箱( 天津市泰斯特儀器公司) ，KQ500DE 超聲波清洗機(昆山舒美超聲儀器有限公司) 。 珍珠菜采自貴州省榕江縣，經鑒定為珍珠菜全 草; 鈉石灰( 成都金山化學試劑有限公司) ; 亞硝酸 鈉( 重慶百倍精細化工廠) ; 超氧化物歧化酶( SOD) 和谷胱甘肽過氧化物酶( GSH-Px) 試劑盒( 南京建 成生物工程研究所，生產批號: 20180302) ，紅景天膠 囊( 北京同仁堂，批準文號: 國食健字 G20100243) ; 昆明種小鼠 90 只，雌雄各半，體重 18 ～ 22 g。

1. 2 動物分組

將 90 只小鼠隨機分為空白組、紅 景天組和珍珠菜組，雌雄各半，每組 30 只，每組分別 進行常壓缺氧實驗、亞硝酸鈉中毒實驗和急性腦缺 血性缺氧實驗。

1. 3 試劑制備

將珍珠菜陰干粉碎，過篩，經 70% 甲醇回流提取 3 次，合并過濾液，濃縮，得浸膏。將 浸膏烘干，按照 1 ml 原藥液含生藥 1 g 的方法 ，珍 珠菜浸膏的得率為 14. 70%，經計算得出應加水將 珍珠菜浸膏配置成 0. 735 g /ml 的溶液，備用。

1. 4 給 藥 劑 量

紅景天膠囊的成 人劑量為 40 mg /( kg·d) ，折合成動物的給藥劑量，經計算得 出紅景天組給藥劑量為 0. 063 g /( ml·d) ，珍珠菜組給藥劑量為 0. 735 g /( ml·d) ，灌 胃 體 積 均 為 10 g /( ml·d) 。空白組給予等量生理鹽水。

1. 5 常壓缺氧實驗

末次灌胃給藥后，將小鼠放入 250 ml 廣口瓶內，瓶內放置鈉石灰 10 g，上置濾紙， 橡膠塞表面涂抹凡士林，塞緊瓶蓋，使裝置密閉，記 錄小鼠在密閉空間內的存活時間。實驗結束后取出 小鼠心臟和大腦，洗凈血液，稱重，勻漿，按照試劑盒 方法測定心肌和大腦中 SOD 和 GSH-Px 活力 。

1. 6 亞硝酸鈉中毒實驗

于末次灌胃給藥 1 h 后， 小鼠腹腔注射 1 ml /( 10 mg·kg) 亞硝酸鈉，記錄小鼠 從亞硝酸鈉注射完畢到死亡的時間，實驗結束后取出 小鼠心臟和大腦，洗凈血液，稱重，勻漿，按照試劑盒 方法測定心肌和大腦中 SOD 和 GSH-Px 的活力。

1. 7 急性腦缺血性缺氧實驗

于末次灌胃給藥 1 h 后，各組均在雙耳連線處快速斷頭，記錄小鼠斷頭后 至張口呼吸次數和喘息停止時間( 以小鼠張口呼吸停 止且舌頭外露為標準停止計時) 。實驗結束后取出小 鼠心臟和大腦，洗凈血液，稱重，勻漿，按照試劑盒方 法測定心肌和大腦中 SOD 和 GSH-Px 的活力 。

1. 8 統計學方法

采用 SPSS17. 0 軟件進行單因素 方差分析、LSD-t 檢驗。

2 結 果

紅景天組和珍珠菜組生 存時間明顯長 于空白組，珍 珠菜組存活時間延長了 35. 51%。珍珠菜組心肌中 SOD 和 GSH-Px 活性明顯高于空白組，腦組織 GSHPx 活力明顯高于空白組( P＜0. 05) ，見表 1。紅景天組和珍珠菜 組生存時間明 顯長 于 空 白 組 ，珍珠菜組存活時間延長了 20. 14%。珍珠菜 組心肌和腦組織中 SOD 和 GSH-Px 活性均明顯高于 空白組( P＜0. 05 或 P＜0. 01) 。見表 2。紅景天組和珍 珠 菜 組 生 存 時 間明顯長于空白組，珍珠菜組存活時間延長了 55. 29%。 珍珠菜組心肌和腦組織中 SOD 和 GSH-Px 活性均明 顯高于空白組( P＜0. 05 或 P＜0. 01) 。見表 3。


3 討 論

珍珠菜屬植物中的主要化學成分為三萜及其皂 苷類、黃酮及其皂苷類、甾醇類、苯并內酯及有機酸類 。研究表明，黃酮類化合物有較好的抗氧化 活性和清除自由基能力，從而對缺氧引起的機體氧 化損傷具有保護作用 。缺氧是臨床上常見的病 理過程，可導致多種疾病發生，引起機體代謝、功能 甚至結構異常，嚴重或長期缺氧可導致機體心腦等 重要器官死亡。小鼠在密閉環境中受到缺氧的損 害，主要反映在心臟和腦部。本實驗結果表明，珍珠 菜粗提物能夠使小鼠缺氧存活時間延長，有助于改 善機體的缺氧損傷。