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          舒美儀器在定量方法研究中的使用

          返回列表 來源:未知 發布日期:2019-08-05 15:44【

          菥蓂子系常用藏藥材,藏文名“寨卡”,為十字花科 植物菥蓂的干燥成熟種子,一年生草本植物,藏醫常用 于清肺熱、腎熱及健胃,主治肺熱、咳嗽、腎熱。在公元 8~9 世紀創作的藏醫藥名著《月王藥診》 和《醫學四 續》中均有菥蓂子配方使用的記錄。清代藏醫藥著作 《晶珠本草》、《藍琉璃》等稱菥蓂(子)為“折嘎哇”,記 錄其:生長在松軟的土地及田間;葉濃綠而厚,莖似竹而 枝多,有光澤,花小,白色,果實似小手鼓,種子小,紅紫 色,表面有明顯的斑點和花紋;味辛,性潤,有蒜味;清肺 熱、腎熱,治肺病、腎病;開胃,燥四肢黃水(即四肢關節 腫脹、疼痛等),治培根木布病、黃水病。《神農本草經》 中描述其味辛、微溫,主明目、目痛淚出,除痹,補五臟, 益精光。



          1 材料

          1.1 儀器


          Linomat 5 半自動薄層點樣儀、TLC Visualizer 薄層 色譜數碼成像系統、winCATS色譜工作站(瑞士卡瑪公 司);LC 20T高效液相色譜儀,包括SPD-M 20A光電二極 管陣列檢測器、LCsolution色譜工作站(日本島津公司); e 2695高效液相色譜儀,包括2998光電二極管陣列檢測 器、Empower 3色譜工作站(美國沃特世公司);BSA 224 S-CW型電子天平、XS 105DU型電子天平(德國賽多利斯公司);Milli-Q 超純水系統(德國默克密理博公司); Q250DE超聲波清洗器(昆山舒美超聲儀器有限公司); DK-S16恒溫水浴鍋(上海森信實驗儀器有限公司);聚 酰胺薄膜(浙江臺州四甲生化塑料廠,批號:20170122, 規格:10 cm×20 cm);HPTLC Silica gel 60型硅膠GF254高 效薄層色譜板(德國默克公司,規格:10 cm×20 cm)。



          1.2 藥品與試劑

          15批菥蓂子藥材,8批于2017年5-8月采集于青海 省海北州門源縣、海東市互助縣等地區,7批為市售購買 樣品,所有樣品均經青海省藥品檢驗檢測院駱桂法主任 藥師鑒定為十字花科菥蓂屬植物菥蓂的干燥成熟種子, 即為菥蓂子;黑芥子苷對照品(北京世紀奧科生物技術 有限公司,批號:130201,純度:≥98%);異牡荊素對照品 (批號:2246,純度:≥99%)、當藥黃素對照品(批號: 4039,純度:≥99%)均購自上海詩丹德生物技術有限公司;甲醇、乙腈均為色譜純(德國默克公司);乙酸乙酯、 冰醋酸等其余試劑均為分析純(西隴科學股份有限公 司);水為超純水。



          2 方法與結果

          2.1 樣品中異牡荊素、當藥黃素的薄層色譜鑒別

          2.1.1 供試品溶液的制備


          稱取菥蓂子藥材 30 g,粉 碎,過50目篩;精密稱取藥材粉末2.0 g,置于錐形瓶中, 加入60%乙醇溶液50 mL,置于90 ℃水浴中加熱回流1 h,過濾;濾液濃縮至無醇味(約剩8~10 mL),再加水10 mL,攪勻,用乙酸乙酯振搖提取 2 次,每次 20 mL,棄去 水液,合并乙酸乙酯液,減壓濃縮得到浸膏。然后取浸 膏加甲醇2 mL使溶解,即得。



          2.1.2 對照品溶液的制備

          分別精密稱取當藥黃素、異 牡荊素對照品 5.08、5.12 mg,分別置于 10 mL 棕色量瓶 中,加甲醇溶解并定容至刻度,即得。



          2.1.3 色譜條件

          薄層板:聚酰胺薄膜;展開劑:三氯甲 烷-甲醇-冰醋酸(11∶1∶1,V/V/V);顯色劑:20 g/L的三 氯化鋁乙醇溶液;點樣量:對照品溶液 2 μL,供試品溶 液 4 μL。 2.1.4 鑒別結果 按照“2.1.1”項下方法分別制備15批 次菥蓂子藥材供試品溶液。分別吸取供試品溶液及 “2.1.2”項下異牡荊素、當藥黃素對照品溶液,注入半自 動薄層點樣儀,按照“2.1.3”項下色譜條件點樣、展開,晾 干,噴以質量濃度為20 g/L的三氯化鋁乙醇溶液,晾干, 置于 366 nm 波長紫外光燈下檢視并拍照。結果,在 15 批次菥蓂子供試品薄層色譜中,在與當藥黃素、異牡荊 素對照品色譜相應的位置上,顯相同的藍色熒光斑點, 其平均比移值分別為0.18、0.72(n=15),色譜圖見圖1。 2.2 樣品中黑芥子苷薄層色譜鑒別 2.2.1 供試品溶液的制備 稱取菥蓂子藥材 30 g,粉 碎,過50目篩;精密稱取藥材粉末1.5 g,置于錐形瓶中,加入25 mL甲醇,超聲處理(功率:250 W,頻率:50 kHz) 30 min,靜置至室溫,濾過,濾液減壓干燥至近干,殘渣加 甲醇適量使溶解,轉移至5 mL棕色量瓶中,加甲醇至刻 度,即得。




          3 討論


          薄層色譜法能夠快速、靈敏、高效地同時分離多種 樣品,且固定相和展開劑的選擇范圍較大,具有操作方 便、設備簡單、分離效率高、專屬性好、分析速度快等特 點,能同時分離多種樣品且斑點明晰鮮艷、直觀,便于鑒 別,彌補了因含有無紫外吸收、無揮發性等成分無法采 用高效液相色譜法和氣相色譜法進行鑒別分析的困境, 近年來在中藥與民族藥研究領域得到了廣泛的應用。 高效液相色譜法在藥材的定性定量分析、質量控制方面 使用也十分廣泛,采用該法對藥材進行多組分含量測定 更有利于控制該藥材的整體質量 。因此,本文采取以 上2種成熟、簡便的方法建立了菥蓂子的質量控制方法。





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