如今對于食品中 PAHs 的研究主要為油脂及油炸食品，對應的提取檢測方法也比較成熟，如索氏提取法、舒美超聲波清洗器萃取法、微波輔助萃取法、加速溶劑提取法、凝膠滲透色譜法等。崔艷紅等研究蔬菜中 PAHs 的提取和測定方法，首先 50 ℃烘干制樣，采用加速溶劑提取法，經(jīng)硫酸磺化和氟羅里硅土柱凈化后用 GC-MS 檢測，回收率在 64% - 124%。張婷婷等研究青島市松針中 PAHs 的含量，采用索氏提取、氧化鋁 - 硅膠凈化柱凈化、GC-MS分析的方法，測定該方法的提取凈化效率在 70.8% 以上。龍明華等研究南寧市蔬菜體內(nèi)PAHs 含量，采用烘干樣品，超聲萃取，弗羅里硅土柱凈化后使用 HPLC 檢測，該方法回收率在69.01% ~ 149.26%。高娟等測定植物提取物中PAHs含量，以環(huán)己烷為溶劑超聲提取，經(jīng)硫酸凈化后用 GC-MS 檢測。王雅琴等研究植物葉片中 PAHs 含量，采用冷凍干燥的方式處理樣品，硅膠凈化和濃縮后用 GC-MS 檢測。蔬菜作為人們膳食主要組成之一，但蔬菜體內(nèi) PAHs 的含量及機理研究較少，提取方法的不成熟成為其主要影響因素之一。這主要是蔬菜體內(nèi)的脂溶性色素、脂肪酸、甾類等物質(zhì)，對 PAHs 的定性、定量產(chǎn)生影響。以上研究中 PAHs 檢測儀器主要集中于 HPLC 及 GC-MS，儀器方法也較為成熟，但蔬菜樣品的前處理技術(shù)存在不足，多采用烘干或冷凍干燥的方式制備樣品，時間長，不適合大量樣品檢測。并且上述前處理方法，僅通過加標實驗測定回收率，以此確定前處理方案，但蔬菜樣品成分復雜且各成分與 PAHs 的共存關(guān)系尚不明確，所加標準品無法達到自然存在狀態(tài)，故以加標樣品為試材的方法存在不足。
以娃娃菜、油麥、豆芽、白蘿卜、茄子為樣品，分別采用烘干制樣和鮮樣勻漿制樣的方式制備試材，經(jīng)相同提取檢測處理，發(fā)現(xiàn)鮮樣樣品中 PAHs 提取量和檢出率均高于烘干樣品。本實驗以葉用萵苣為實驗對象，鮮樣打漿處理制備試材，采取單因素和正交實驗的方法優(yōu)化試驗方案，利用 HPLC 測定不同前處理后蔬菜體內(nèi) PAHs 殘留量，并對提取效果最好的處理方案采取低、中、高三個階段的加標回收率實驗，驗證前處理方案。
儀器：BSA124S電子精密天平 德國賽多利斯；Waters-e2695 高效液相色譜系統(tǒng) 美國Water 公司；SUPELCOSILTM LC-PAH 液相色譜柱 美國 Supelco 公司；KQ-400DE超聲波清洗機 昆山舒美超聲儀器有限公司；RE-52A 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上海亞榮生化儀器廠；3K15 高速冷凍離心機 德國 sigma 公司；ZGDCY-12 干式氮吹儀 上海梓桂儀器有限公司；L18-YL08打漿機 九陽股份有限公司；Vortex-Genie2 渦旋混勻器 美國 Scientific Industries 公司。
萵苣體內(nèi)PAHs提取、凈化工藝流程
萵苣勻漿→加入提取劑→超聲波提取→離心（8000 r/min，5 min）→重復 3 次，合并提取液→硫酸磺化→2%的無水硫酸鈉溶液洗脫→減壓濃縮至 3 mL→弗羅里硅土柱凈化→洗脫液濃縮→過 0.22 μm 濾器→PAHs 粗提液取一定質(zhì)量的萵苣葉片鮮樣制成勻漿置于離心管待測，取 40 mL 正己烷溶液與之混合，渦旋 2 min 后在 20 ℃、超聲波功率 480 W 條件下提取 20 min，8000 r/min 下離心 5 min,重復提取 3 次，合并上清液。
磺化階段：將提取液轉(zhuǎn)入分液漏斗中，向其中添加 10 mL 濃度為 60%的硫酸溶液進行磺化，震蕩 5 min，如有乳化則用 30 mL 2%無水硫酸鈉溶液破乳，靜置分層后棄去水相，將有機層于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至 3 mL 左右，進行固相萃取凈化程序。將濃縮液置于 5 mL 正己烷活化的弗羅里硅土柱，上樣后用 12.00 mL 洗脫液（二氯甲烷：正己烷=2V:8V）洗脫。收集洗脫液，利用干式氮吹儀蒸發(fā)至干，轉(zhuǎn)化溶劑為 1.5 mL 乙腈，過 0.22 μm 有機濾器后用HLCP/UV 測定 PAHs 含量，通過比較 PAHs 殘留量高低，確定適宜的工藝參數(shù)。
通過單因素分析和正交實驗建立蔬菜體內(nèi) PAHs 檢測前處理工藝，得出影響檢測 PAHs殘留量的各因素主次順序是：洗脫液配比＞樣品質(zhì)量＞硫酸濃度＞提取液體積＞硫酸體積＞超聲時間。最佳處理條件：提取液體積 48mL、樣品質(zhì)量 13 g、超聲波提取時間 30 min、硫酸體積13 mL、硫酸濃度35%、洗脫液類型6 mL正己烷和6 mL二氯甲烷/正己烷（V1:V2=3:7），在此條件下測得萵苣體內(nèi) PAHs 含量最高為 961.541 μg/kg；此工藝條件下進行加標回收率實驗驗證，得出加標回收率為 80.54%～142.04%，RSDs 為 1.35%～8.96%，具有較好的準確度和精密度。綜上得出該前處理工藝提取效果好、制樣簡單可應用于蔬菜體內(nèi) PAHs 提取，為蔬菜體內(nèi) PAHs 變化機理研究奠定基礎(chǔ)。
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